Люмінесцентна мікроскопія: особливості дослідження

Термін "мікроскопія" має грецьке коріння. У перекладі воно означає дослідження об'єктів із застосуванням високоточних приладів. Останнім часом все більш популярними стали люмінесцентна і електронна мікроскопія.

люмінесцентна мікроскопія

Роздільна здатність

Під нею, як правило, розуміють мінімальневідстань, на якому можуть перебувати чітко помітні об'єкти. Від роздільної здатності устаткування буде залежати ступінь проникнення в мікроскопічний світ, можливість розглянути розмір досліджуваного елемента. При великому збільшенні межі об'єктів можуть зливатися. Відповідно, існують певні межі, далі яких наближення елементів безглуздо.

Метод люмінесцентної мікроскопії: механізм

При перетворенні енергії, яку поглинаєречовина, в видиме випромінювання відбувається світіння. Його називають люмінесценцією. Це явище пов'язане з тим, що деякі речовини під впливом світла починають випускати промені з іншого (як правило, великий) довжиною хвилі. Крім цього, деякі об'єкти, що мають при нормальному освітленні певний колір, під впливом ультрафіолету змінюють своє забарвлення.

 метод люмінесцентної мікроскопії

специфіка

Об'єкт, який не можна побачити в ультрафіолетовомусвітлі, може випромінювати яскравий блиск, якщо його обробити спеціальним розчином. У ньому елементи світяться різними кольорами в темряві. Сила випромінювання різна, але, як правило, вона невелика. У зв'язку з цим люмінесцентна мікроскопія ефективна в затемненому приміщенні. При використанні цього виду дослідження об'єкт проглядається в світлі, який він сам і випромінює. Хімічний склад тканин, клітин впливатиме на якість вивчення. Люмінесцентна мікроскопія вважається певною мірою гістохімічним дослідженням.

Класифікація

люмінесцентна мікроскопія може бути первинною чи вторинною. В останньому випадку об'єкт обробляється спеціальними з'єднаннями, що дають світіння. первинна люмінесцентна мікроскопія грунтується на власній здатності досліджуваного елемента випромінювати світло.

люмінесцентна і електронна мікроскопія

устаткування

Люмінесцентна мікроскопія виконується ззастосуванням найрізноманітніших пристроїв. В якості основного їх елемента виступає освітлювач. Він оснащується лампою ультрафіолетового випромінювання. Крім цього, в пристроях використовується набір фільтрів. У деяких приладах їх досить багато різної конфігурації. Залежно від того, який колір застосовується для збудження люмінесценції - ультрафіолетовий або синій, між джерелом світла і досліджуваним об'єктом поміщають відповідний фільтр. Оскільки світіння мікроскопічного елемента енергетично слабкіше збуджуючого світла, воно буде вловлювати тільки за однієї умови. Надлишок променів, що відходять від джерела, повинна бути відтятий жовто-зеленим фільтром. Він розміщується на окулярі приладу. Найбільш вираженим ефект люмінесценції буде тоді, коли фільтр повністю відсіче промені, що відходять від світлового джерела.

З чого складається установка в видимому випромінюванні? У ній присутній яскравий світловий джерело і біологічний мікроскоп. Між дзеркалом приладу і лампою встановлюють синьо-фіолетовий фільтр. Це може бути ФС-1, УФС-3 і так далі. Жовтий фільтр надаватися на окуляр мікроскопа. З їх допомогою на об'єкт падає синьо-фіолетове світло. Він і збуджує люмінесценцію. Але цей світ може заважати побачити світіння. Тому на шляху до ока він відсікається жовтим фільтром. Установка освітлення проводиться за методом Келера, з одним винятком. Діафрагму конденсора необхідно повністю відкрити. При дослідженні важливо використовувати нефлуоресцірующіх іммерсійне масло. Для зниження власного світіння до нього додають окислювач (2-10 крапель / 1 г).

люмінесцентна мікроскопія застосування

Люмінесцентна мікроскопія: застосування в мікробіології

Перевагами цього виду дослідження є:

  1. Можливість отримання кольорових зображень.
  2. Високий рівень контрастності самоізлучающіх елементів на чорному тлі.
  3. Виявлення і визначення локалізації окремих видів вірусів і мікробів.
  4. Можливість вивчення прозорих і непрозорих живих організмів.
  5. Вивчення життєвих процесів в їх динаміці.

Необхідно також сказати, що люмінесцентна мікроскопія сприяє розвитку найтонших методів гисто- і цитохімії, експрес-діагностики.

</ P>
сподобалося:
0
Схожі статті
Аналіз на безпліддя у чоловіків
Електронна мікроскопія - інструмент
Методи Психологічного Дослідження
Мікроскопічні методи дослідження в
Методологія та методи наукового дослідження
Біологія. Вивчати структуру органоїдів
Методи дослідження в курсовій роботі по
Лампа люмінесцентна: принцип роботи і
Види люмінесцентних ламп, пристрій,
Популярні пости
up